奶牛乳房炎根据临床症状，以乳房和乳汁有无肉眼可见病理变化可分为：临床型乳房炎和非临床型乳房炎（隐性乳房炎）。一般来讲临床型乳房炎造成的损失达30%，非临床型乳房炎占70%，故在养牛生产管理中，对隐性乳房炎的检测非常重要。临床型乳房炎根据其临床症状，较易作出诊断。确诊特定的病原体需做细菌分离培养或PCR诊断。

1 临床症状观察

1.1 临床型乳房炎 急性病例的特征是乳房发红、肿胀、变硬、疼痛，乳汁异常，奶量减少。同时伴有体温升高至40℃以上，食欲减退或废绝，脉搏增速，脱水，精神沉郁等全身症状。亚急性病例，乳汁呈水样，颜色发黄或红，含絮片和凝块。乳房轻度发热、肿胀，最后乳房萎缩，成"瞎乳头"。 

1.2 隐性乳房炎 隐性乳房炎造成的损失超过临床型乳房炎，而这种损失是人们不能直接观察到的。其特征是乳房和乳汁无肉眼可见变化，然而乳汁在理化性质、细菌学上发生明显变化。

2 实验室诊断

2.1 乳汁细胞学检测法

通过间接测定乳中体细胞数来诊断隐性乳房炎的方法。健牛每毫升乳汁体细胞数量小于10万个，大部分国家规定大于50万个判定为乳房炎。

2.2乳汁理化检测法

乳房炎时，Na 、Cl-浓度增加，电导率增加，PH值增加，呈碱性，升高的程度取决于炎症的程度。

2.3.乳汁中病原菌分离鉴定检测法

依靠乳汁中微生物学培养和生化试验进行细菌的分离鉴定。此方法有许多局限性，如诊断隐性乳房炎时容易产生假阴性结果、乳汁中高体细胞数影响细菌的生长、工作量很大至少需要2~3天的时间才能做出鉴定结果，不利于对患牛进行及时的治疗。支原体在某些国家和地区也是一种较为重要的乳房炎病原菌，但是由于此种微生物不能在传统培养基中生长，对其诊断具有很大的难度。

2.4 乳汁中病原菌的PCR检测法

2.4.1 PCR法的原理

PCR即聚合酶链式反应，是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。

2.4.2 PCR法的优势

与传统的微生物法相比，PCR检测法优势明显，能快速、特异地检测出奶牛乳房炎的主要致病菌，从而确定致病菌类型。

（1）检测时间短 可以在4h时内得到结果。（2）检测灵敏度高 对活的及生长受抑制的细菌有同样的灵敏度。（3）检测病原菌的范围广 很多病原菌（如牛支原体等）不能在普通培养基中生长，微生物检测时会呈现假阴性结果，但用PCR法只需设计出其特异性引物，便可进行检测。（4）不受抗生素等影响 即使是已经或正在使用抗生素治疗的重复检测结果也具可靠性，还可以用于检测添加了溴硝丙二醇的牛乳样本，样本只需常温运输。

2.4.3 PCR诊断技术的应用

随着分子生物学技术的快速发展，用分子技术诊断病原菌已经得到了广泛的应用。

实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测是PCR技术从定性到定量的飞跃。Real-time PCR利用荧光信号监测整个PCR扩增过程，通过建立标准曲线来对未知模板进行定量分析。近年来，对乳房炎病原菌分子诊断法的报道大多都集中于应用Real-time PCR技术，此法已经成为乳房炎病原菌诊断方法的研究热点。检测灵敏度高，可以明确地检测出乳房炎样品中含有的细菌数量。这种检测方法逐渐被养殖场认识和重视，将会给其带来更大的便利性和收益。